SN_T 3147-2017 出口食品中鄰苯二甲酸酯的測定方法
前言
1 范圍
本標準規定了食品中鄰苯二甲酸二甲酯、鄰苯二甲酸二乙酯、鄰苯二甲酸二異丙酯、鄰苯二甲酸二烯丙酯、鄰苯二甲酸二丙酯、鄰苯二甲酸二異丁酯、鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯、鄰苯二甲酸二異戊酯、鄰苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯、鄰苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯、鄰苯二甲酸二戊酯、鄰苯二甲酸二已酯、鄰苯二甲酸丁基芐基酯、鄰苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯、鄰苯二甲酸二環己酯、鄰苯二甲酸二（2-乙基）已酯、鄰苯二甲酸二庚酯、鄰苯二甲酸二苯酯、鄰苯二甲酸二正辛酯、鄰苯二甲酸二異壬酯、鄰苯二甲酸二異癸酯、鄰苯二甲酸二壬酯、鄰苯二甲酸二異辛酯的氣相色譜-質譜檢測方法和液相色譜質譜/質譜檢測方法。
本標準適用于酒類、液體飲料、固體飲料、果醬、果凍、調味品、香精香料、乳制品、面淀粉制品、橄欖油及糕點中鄰苯二甲酸二甲酯等24種鄰苯二甲酸酯類化合物的測定和確證。
2規范性引用文件
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GB/T 6682分析實驗室用水規格和試驗方法
第一法氣相色譜-質譜法
3方法提要
食品中鄰苯二甲酸酯類化合物經正已烷或乙腈提取、液液萃取或固相萃取凈化后，經氣相色譜-質譜聯用儀進行測定。采用特征選擇離子監測掃描模式（SIM），外標法定量。
4試劑和材料
除特殊注明外，所有試劑均為分析純，水為符合GB/T6682規定的一級水（儲存于玻璃瓶中，避免接觸塑料）
4.1 正己烷：色譜純。
4.2乙腈：色譜純。
4.3甲醇：色譜純。
4.4丙酮：色譜純。
4.5 氯化鈉。
4.6硫酸鎂：色譜純。
4.7醋酸鈉：色譜純。
4.8 5%甲醇溶液：量取5 mL甲醇，用水定容100 mL混勻，備用。
4.9 標準品：詳細信息見附錄A中的表A.1。
4.10標準儲備液：分別稱取適量上述各種標準品（**至0.1 mg），用正已烷配制成1 000 mg/L的儲備液，于0℃~4℃冰箱中避光保存。
4.11標準使用液：將標準儲備液用正已烷稀釋至濃度為0.1 mg/L，0.5 mg/L，1.0 mg/L，2.0 mg/L，
5.0mg/L，10.0mg/L的標準系列溶液待用。
4.12親脂性二乙烯苯和親水性N-乙烯基吡咯烷酮共聚物填料固相萃取玻璃柱或相當親脂親水共聚物填料固相萃取玻璃柱：Oasis HLB Glass柱（200 mg，5 mL），使用前，加入5 mL甲醇和5 mL純水進行活化。
非商業性聲明：4.12中所列出的試驗用共聚物填料固相萃取玻璃柱僅是為了提供參考，并不涉及商業目的，鼓勵標準使用者嘗試不同型號的共聚物填料固相萃取玻璃柱。
4.13 N-丙基乙二胺固相分散吸附劑（PSA）：粒徑為40μm或120μm，孔徑為6 nm（60 A）。
4.14 C18 固相分散吸附劑：粒徑為40μm或120μm，孔徑為60 A。
5儀器和設備
5.1氣相色譜-質譜聯用儀（GC-MS），配電子轟擊離子源（EI）。
5.2分析天平：感量0.1 mg和0.01 g。
5.3 冷凍離心機：不低于4 000 r/min。
5.4氮吹儀。
5.5振蕩器。
5.6渦旋混合器。
5.7超聲提取器。
5.8組織搗碎機。
6試樣制備、保存
6.1試樣制備
6.1.1固體、半固體、液體樣品
至少取同一批次3個最小完整包裝樣品（混合后的固體樣品總量100g~500g，液體樣品100mL~500mL），置于硬質全玻璃器皿中，固體或半固體樣品粉碎混勻，液體樣品混合均勻，待稱樣處理。
6.1.2膠囊、錠狀或粉狀樣品
取有代表性樣品500 g（膠囊取內含物），采用粉碎機粉碎后，再將其研磨成細粉狀，裝入潔凈的玻璃盛樣容器內，密封并標明標記。
6.2試樣保存
粉狀和液體試樣于0 ℃~4 ℃保存；其他試樣于-18 ℃以下冷凍保存。
在制樣的操作過程中，避免接觸塑料，應防止樣品受到污染或發生被測物含量的變化。
7測定步驟
7.1 試樣處理
7.1.1液體試樣
7.1.1.1 葡萄酒、18%白酒、洋酒、58%白酒
準確稱取混合均勻的液體試樣1g（**到0.01g）于25mL燒杯中，根據樣品乙醇濃度加入水稀釋，使乙醇濃度小于5%，混勻，將稀釋液加入事先活化好的Oasis HLB Glass柱（4.12），流速控制在1 mL/min內，之后用5mL 5%甲醇溶液（4.8）淋洗，待淋洗液流干后，用5mL乙酸乙酯溶液洗脫，收集洗脫液于40℃氮吹至近干后揮干，用正已烷定容至1.00 mL，供GC-MS分析。
7.1.1.2 果汁、香精
準確稱取混合均勻的液體試樣5g （**到0.01 g）（含有二氧化碳氣體的先超聲20 min除去二氧化碳）于25mL具塞磨口玻璃試管中，加入氯化鈉至水相飽和，加入5.0mL正已烷，渦旋1min，4000r/min離心2 min，收集上清液，供GC-MS分析。
7.1.1.3固化乳酸菌飲料 、牛奶
準確稱取混合均勻的液體試樣5g （**到0.01 g）（含有二氧化碳氣體的先超聲20 min除去二氧化碳）于25 mL具塞磨口玻璃試管中，加10 mL乙腈，渦旋1 min，4 000 r/min離心2 min，取上清液到一潔凈的25mL玻璃離心管中，加入氯化鈉至水相飽和，渦旋1 min.靜置或離心分層，取上層（乙腈層）到另一潔凈玻璃管中，吹氮濃縮至近干后揮干，用正已烷定容至5.00mL，供GC-MS分析。
7.1.2 葡萄果凍、柚子醬、調味精粉
準確稱取混合均勻固體或半固體試樣5g（**到0.01g）于50mL具塞磨口玻璃試管中，加水10 mL（視試樣水分含量，可適當增加加水量），加入氯化鈉至水相飽和加入10.0 mL乙腈，渦旋1 min，超聲提取20 min，4 000 r/min離心2 min，收集上清液。重復提取一次，合并上清液。將提取液于40℃氮吹至近干后揮干，用正已烷定容至5.00mL，供GCMS分析。
7.1.3雞蛋面、水果酥
準確稱取混合均勻試樣1 g （**到0.01 g）于25 mL具塞磨口玻璃試管中，加入5 mL乙腈，渦旋1 min，4 000 r/min離心2 min，收集上清液。重復提取一次，合并上清液。將提取液于40 ℃氮吹至近干，用甲醇定容至1 mL，放入-18 ℃的冰箱冷藏2 h，4000 r/min0C~4 C冷凍離心2 min，取上清液，供GC-MS分析。
7.1.4橄欖油
準確稱取混合均勻試樣5g （**到0.01 g）于50 ml具塞磨口玻璃試管中，準確加入15 mL乙腈，加入6g MgSO4和1.5 g醋酸鈉，渦旋1 min 4 000 r/min離心2 min，收集上清液，于40℃氮吹至近干。用乙腈定容至5 mL，加入50 mg PSA粉（4.13），50 mg C18粉（4.14），150 mg MgSO4渦旋1min，4000r/min離心2min，取上清液，供GC-MS分析。
7.2 測定
7.2.1氣相色譜條件
氣相色譜條件如下：
a） 色譜柱：TG/DB-5MS石英毛細管柱，60 m（柱長）×0.25 mm（內徑），0.25μm（膜厚），或相當者；
b） 其他色譜條件參見附錄B中的B.1。
7.2.2質譜條件
質譜條件參見B.2。
7.2.3氣相色譜- 質譜法測定
根據樣液中被測物含量情況，選定濃度相近的標準工作溶液，對標準工作溶液、樣液及空白試驗溶液等體積參插jin樣測定，標準工作溶液和待測樣液中每種鄰苯二甲酸酯的響應值均應在儀器檢測的線性范圍內。在上述氣相色譜質譜條件下，24種鄰苯二甲酸酯化合物的參考保留時間參見表B.3，標準品總離子流色譜圖和全掃描質譜圖參見附錄參見圖C.1和圖C.2。
試樣待測液和標準品的選擇離子在相同保留時間處（±0.5%）出現，并且對應質譜碎片離子的質荷比與標準品一致，其豐度比與標準品相比應符合表1，可定性確證目標分析物。各鄰苯二甲酸酯類化合物的保留時間、定性離子和定量離子見表B.3。各鄰苯二甲酸酯類化合物標準物質的氣相色譜質譜選擇離子色譜圖見附錄C。
7.3空白實驗
除不加試樣外，均按上述測定步驟進行。
8結果計算和表述
8.1 用色譜數據處理機或按式（1）分別計算試樣中被測化合物的含量：
式中：
Xi——試樣中每種被測化合物含量，單位為毫克每千克（mg/kg）；
Ai——樣液中每種被測化合物的峰面積；
ci——標準工作液中每種化合物的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；
Vi——樣液最終定容體積，單位為毫升（mL）；
Ais——標準工作液中每種化合物的峰面積；
mi——最終樣液代表的試樣質量，單位為克（g）。
8.2 計算結果應扣除空白值，結果保留三位有效數字。
9方法定量限、回收率
9.1 定量限
本方法的定量限（LOQ）DINP、DIDP、DINOP為0.5 mg/kg，其他化合物為0.1 mg/kg。
9.2 回收率
分別在葡萄酒、洋酒、18%白酒、58%白酒、番石榴汁、固體乳酸菌飲料、調味精粉、葡萄果凍、檸檬香精、水果酥、柚子醬、雞蛋面、食用橄欖油、木瓜牛奶中添加24種鄰苯二甲酸酯，添加濃度及其回收率數據參見附錄D中的表D.1和表D.2。
10質量控制
10.1 取樣制樣
取樣制樣均應采用不銹鋼或玻璃器具，避免接觸塑料。
10.2有機溶劑
本標準中使用到的所有有機溶劑，在使用前，應進行空白實驗。如本底值高于定量限，應對有機溶劑進行重蒸，直至本底值低于定量限。
10.3玻璃器皿
所用玻璃器皿洗凈后，用去離子水淋洗三次，于丙酮浸泡1 h，在200 ℃下烘干2 h，冷卻至室溫備用。
